Pengaruh konsentrasi penginduksi metanol terhadap produksi rHA dalam inang P.pastoris galur smd1168 proses pemurnian serta konjugasi dengan Gd-DTPA membentuk senyawa kompleks GD-DTPA-rHA

RINA ANGGRAENI

Pengaruh konsentrasi penginduksi metanol terhadap produksi rHA dalam inang P.pastoris galur smd1168 proses pemurnian serta konjugasi dengan Gd-DTPA membentuk senyawa kompleks GD-DTPA-rHA

dc.contributor.advisor	Shabarni G.
dc.contributor.advisor	R. Ukun M.S. Soedjana Atmadja
dc.contributor.author	RINA ANGGRAENI
dc.date.accessioned	2024-05-22T04:52:52Z
dc.date.available	2024-05-22T04:52:52Z
dc.date.issued	2018-10-04
dc.description.abstract	Human Serum Albumin (HSA) adalah salah satu protein yang paling banyak digunakan dalam industri farmasi. Salah satu aplikasi HSA dalam bidang farmasi adalah untuk meningkatkan waktu relaksasi pada MRI (Magnetic Resonance Imaging). Kombinasi agen pengontras Gd-DTPA (Gadolinium Dietilen Triamin Penta Asetat) dengan HSA dapat menghasilkan pencitraan yang lebih baik dibanding Gd-DTPA tanpa HSA. Penggunaan HSA pada MRI memerlukan HSA autentik dengan kemurnian yang tinggi. Fraksionasi HSA dari plasma darah menghasilkan HSA dalam jumlah sedikit serta memungkinkan terjadinya kontaminasi. Teknologi DNA rekombinan merupakan alternatif untuk menghasilkan Albumin rekombinan manusia (rHA) versi autentik dalam jumlah yang banyak. Tujuan penelitian ini adalah optimasi ekspresi rHA dalam sistem ekspresi P. Pastoris galur SMD1168, pemurnian rHA hasil ekspresi menggunakan teknik kromatografi, dan konjugasi rHA dengan GD-DTPA menjadi GD-DTPA-rHA. Metode penelitian ini adalah optimasi ekspresi rHA dengan memvariasikan konsentrasi penginduksi metanol yaitu 0,75; 1,0; 1,25; dan 1,5%. rHA dikarakterisasi dengan SDS-PAGE dan dimurnikan menggunakan metode kromatografi filtrasi gel, karakterisasi kemurnian rHA dengan SEC-HPLC, penentuan konsentrasi rHA dengan metode Lowry, selanjutnya rHA dikonjugasikan dengan DTPA dan ion Gd+3 menjadi Gd-DTPA-rHA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kondisi optimum ekspresi rHA oleh P. pastoris adalah dengan penginduksi metanol 1,5% pada jam ke-48, produksi rHA pada kondisi optimum menghasilkan kadar protein total 0,44 mg/mL, pemurnian rHA dengan kromatografi filtrasi gel menghasilkan kemurnian rHA sebesar 81,84%. Produk Gd-DTPA-rHA berhasil disintesis yang ditandai dengan adanya pita tunggal dari HPLC dengan menggunakan kolom SEC. Hasil HPLC menunjukkan bahwa Gd-DTPA-rHA hasil sintesis keluar pada waktu retensi 10,493 menit.
dc.identifier.uri	https://repository.unpad.ac.id/handle/kandaga/140120150010
dc.subject	rekombinan human albumin (rHA)
dc.subject	Tidak ada keyword
dc.subject	Tidak ada keyword
dc.title	Pengaruh konsentrasi penginduksi metanol terhadap produksi rHA dalam inang P.pastoris galur smd1168 proses pemurnian serta konjugasi dengan Gd-DTPA membentuk senyawa kompleks GD-DTPA-rHA