PEMURNIAN IMUNOGLOBULIN-Y (IgY) ANTI- MPT64 MENGGUNAKAN METODE KROMATOGRAFI ADSORPSI TIOFILIK
No Thumbnail Available
Date
2022-06-05
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Dalam pengembangan kit diagnostik tuberkulosis, diperlukan antibodi anti-MPT64 yang murni guna mendeteksi antigen MPT64 dan menghindari false positive. Antibodi poliklonal (IgY) yang digunakan dalam pengembangan kit ini diisolasi dari kuning telur ayam. Kandungan protein, lipid, dan lipoprotein yang tinggi pada hasil isolasi IgY perlu dihilangkan agar mekanisme IgY anti-MPT64 dapat diketahui seutuhnya tanpa gangguan komponen lain. Salah satu metode penghilangan komponen tersebut dengan menggunakan metode kromatografi adsorpsi tiofilik yang merupakan kolom spesifik terhadap IgY. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan rasio persentase gradien pengelusi sehingga dapat diperoleh IgY anti-MPT64 dengan tingkat kemurnian terbaik secara kualitatif. Metode yang dilakukan meliputi pemurnian menggunakan metode kromatografi adsorbsi tiofilik dengan rasio persentase gradien pengelusi 5 step gradien dan 2 step gradien, kemudian dikarakterisasi dengan SDS-PAGE dan ditetapkan kadar IgY anti-MPT64 dengan metode Lowry. Hasil karakterisasi terbaik akan dikarakterisasi lanjut dengan dot blot. Hasil penelitian menunjukkan bahwa hasil pemurnian dengan 5 step gradien memiliki tingkat kemurnian lebih baik dibandingkan hasil pemurnian dengan 2 step gradien berdasarkan profil pita SDS-PAGE, meskipun perolehan kadar pada hasil pemurnian 2 step gradien (2,2632 mg/mL) lebih tinggi dibandingkan kadar hasil pemurnian 5 step gradien (1,35482 mg/mL).
Description
Keywords
Tuberkulosis, MPT64, IgY