OPTIMASI EKSPRESI GEN PENGKODE PEPTIDA ANTIMIKROBA REKOMBINAN LL-37 (pJexpress411_LL37) PADA Escherichia coli BL21 (DE3)
No Thumbnail Available
Date
2022-06-05
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Peptida LL-37 merupakan peptida antimikroba kelompok cathelicidin yang
diproduksi alami oleh sel epitel dan limfosit pada manusia. Sebagai peptida
antimikrobial, LL-37 memiliki aktivitas beragam seperti antimikroba, antijamur,
antivirus, antikanker dan dapat memodulasi sistem imun bawaan pada saat terjadi
inflamasi. Untuk memperoleh peptida LL-37 rekombinan dalam jumlah optimal,
ekspresi gen tersebut dapat dilakukan dengan teknologi DNA rekombinan yaitu
mentransformasikan LL-37 hasil konstruksi plasmid pJexpress411 kedalam sel
inang berupa Escherichia coli BL21 (DE3). Pada penelitian ini dilakukan optimasi
faktor-faktor yang mempengaruhi proses ekspresi protein rekombinan LL-37 dalam
Escherichia coli BL21 (DE3) menggunakan Central Composite Design (CCD),
sehingga diperoleh hasil ekspresi yang optimum. Faktor-faktor yang dioptimasi
meliputi konsentrasi penginduksi (IPTG) dan waktu penginduksi menggunakan
kombinasi sesuai rancangan CCD. Hasil optimasi ekspresi protein rekombinan LL-37 dievaluasi menggunakan karakterisasi protein SDS-PAGE, kemudian
dikuantifikasi menggunakan software ImageJ. Data yang diperoleh dianalisis
kembali secara statistika. Hasil penelitian ini diperoleh ekspresi gen pengkode
peptida LL-37 yang optimal pada konsentrasi IPTG sebesar 1,3 mM selama 4 jam.
Description
Keywords
LL-37, Central Composite Design, IPTG