OPTIMASI EKSPRESI GEN PENGKODE PEPTIDA ANTIMIKROBA REKOMBINAN LL-37 (pJexpress411_LL37) PADA Escherichia coli BL21 (DE3)

Abstract

Peptida LL-37 merupakan peptida antimikroba kelompok cathelicidin yang diproduksi alami oleh sel epitel dan limfosit pada manusia. Sebagai peptida antimikrobial, LL-37 memiliki aktivitas beragam seperti antimikroba, antijamur, antivirus, antikanker dan dapat memodulasi sistem imun bawaan pada saat terjadi inflamasi. Untuk memperoleh peptida LL-37 rekombinan dalam jumlah optimal, ekspresi gen tersebut dapat dilakukan dengan teknologi DNA rekombinan yaitu mentransformasikan LL-37 hasil konstruksi plasmid pJexpress411 kedalam sel inang berupa Escherichia coli BL21 (DE3). Pada penelitian ini dilakukan optimasi faktor-faktor yang mempengaruhi proses ekspresi protein rekombinan LL-37 dalam Escherichia coli BL21 (DE3) menggunakan Central Composite Design (CCD), sehingga diperoleh hasil ekspresi yang optimum. Faktor-faktor yang dioptimasi meliputi konsentrasi penginduksi (IPTG) dan waktu penginduksi menggunakan kombinasi sesuai rancangan CCD. Hasil optimasi ekspresi protein rekombinan LL-37 dievaluasi menggunakan karakterisasi protein SDS-PAGE, kemudian dikuantifikasi menggunakan software ImageJ. Data yang diperoleh dianalisis kembali secara statistika. Hasil penelitian ini diperoleh ekspresi gen pengkode peptida LL-37 yang optimal pada konsentrasi IPTG sebesar 1,3 mM selama 4 jam.

Description

Keywords

LL-37, Central Composite Design, IPTG

Citation

Collections